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如何用祎鴻凱氏定氮儀測(cè)定雞蛋內(nèi)的蛋白質(zhì)含量？
氨基酸是由具有酸性的羧基( - COOH) 和堿性的氨基( - NH2) 相互作用而形成的一種中性的內(nèi)鹽, 當(dāng)在堿性條件下加入甲醛溶液時(shí), 氨基酸便與甲醛反應(yīng), 形成一種化合物,該化合物氨基上的2 個(gè)氫原子被次甲基所取代, 于是便失去了氨基的堿性特性, 從而使其呈酸性的羧基釋放出來(lái), 并使其溶液的電化學(xué)特性發(fā)生變化。由于該化學(xué)反應(yīng)是可逆的,而且一定要有適當(dāng)過(guò)量的甲醛存在, 才能使該反應(yīng)進(jìn)行充分并迅速達(dá)到化學(xué)反應(yīng)平衡狀態(tài), 這樣就可以利用直接電位方法求出牛奶中游離氨基酸的含量, 并且再根據(jù)生鮮牛奶中的游離氨基酸與其蛋白質(zhì)總量之間保持衡定比例關(guān)系的原理,利用電位法直接求出牛奶中蛋白質(zhì)的含量。但是, 由于牛奶本身膠體溶液體系的復(fù)雜多變性以及直接電位法在測(cè)定中易受其它多種因素干擾等諸多原因, 使其測(cè)定值與實(shí)際含量之間可能存在著較大的偏差。為了使直接電位法測(cè)定牛奶中的蛋白質(zhì)含量的這一方法變?yōu)楝F(xiàn)實(shí),可將凱氏定氮法所測(cè)定的牛奶中蛋白質(zhì)的含量對(duì)牛奶與甲醛溶液在反應(yīng)后的平衡電位值作圖, 再經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理, 得出了牛奶中蛋白質(zhì)的含量與其最終平衡電位值之間的線性回歸關(guān)系方程。這樣就可以通過(guò)測(cè)定其電位值, 并經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程的計(jì)算, 直接得到牛奶中蛋白質(zhì)的含量。
